測定原理
測定原理
サンドウィッチ酵素免疫測定法(ELISA;enzyme-linked immunosorbent assay)によるHMGB1定量測定試薬です。抗HMGB1ポリクローナル抗体を結合させた固相ウェルに希釈検体を加え、検体中のHMGB1を抗体と特異的に結合させます。次にペルオキシダーゼ標識抗体を加えて、抗原抗体複合体(サンドウィッチ)を形成させます。この複合体に発色剤を加えて発色させます。発色停止後、450nmにおける吸光度を測定します。
測定方法

| HMGB1 ELISA KitⅡ |
|---|
| 検体希釈液をプレートに分注(100µL) |
| ↓ |
| 検体の分注(10µL) |
| ↓ 37℃, 20時間~24時間 |
| 洗浄(5回) |
| ↓ |
| ペルオキシダーゼ標識抗体液の分注(100µL / ウェル) |
| ↓ 25℃, 2時間 |
| 洗浄(5回) |
| ↓ |
| 発色試液の分注(100µL / ウェル) |
| ↓ 室温, 30分 |
| 反応停止液の分注(100µL / ウェル) |
| ↓ |
| 吸光度の測定(450nm) |